Методика электрофореза в агарозном геле

Методика электрофореза в агарозном геле

Более подробное описание метода см. G Geserick (1977). Мы приводим методику электрофореза в агарозном геле по Р. Teisberg (1970), являющуюся модификацией методики С. A Alper, R Р Ргорр (1968) Приготовление геля: используется 0,8—1,0% раствор агарозы в гелевом буфере (различные сорта агарозы обладают неодинаковой вязкостью). Расплавленный гелевый раствор разливают на стеклянные пластины толщиной не более3 мм (более толстые стекла затрудняют процесс охлаждения геля при проведении электрофореза) в количестве, при котором образуется 1,25-миллиметро380? j ) вый слой агарозного геля.

Расплавленный гелевый раствор разливают на стеклянные пластины толщиной не более3 мм (более толстые стекла затрудняют процесс охлаждения геля при проведении электрофореза) в количестве, при котором образуется 1,25-миллиметровый слой агарозного геля. Лучшее разделение достигается не на свежеприготовленных гелях, s на гелях, с момента приготовления которых прошло 1—3 дня. Нанесение сывороточных проб: в стартовые щели, расположенные в 1,5 см от катодного края пластины, на фильтровальных бумажках (Whatman № 3или FN 8) шириною 8—10 мм вносят исследуемые образцы сывороток крови, в количестве 5 мкл. Электрофорез: необходимо начинать сразу же после заполнения сыворотками стартовых щелей! Используют проточное водяное охлаждение (10°С). Электрофорез проводят в течение 2,5 ч при градиенте напряжения 20 В/см (важным критерием окончания электрофореза является то обстоятельство, что путь пробега протеинов СЗ должен составить не менее 3 см). Окрашивание: проводят либо сразу же по окончании электрофореза (свежий гель), либо после его высыхания.

Для окраски пригодны любые белковые красители: амидо черный 10 В, кумасси бриллиантовый синий или нигрозин:.

1 звезда2 звезды3 звезды4 звезды5 звезд (Еще не оценили)
Загрузка ... Загрузка ...

Оставить комментарий

Почта (не публикуется) Обязательные поля помечены *

Вы можете использовать эти HTML теги и атрибуты: <a href="" title=""> <abbr title=""> <acronym title=""> <b> <blockquote cite=""> <cite> <code> <del datetime=""> <em> <i> <q cite=""> <strike> <strong>

Подтвердите, что Вы не бот — выберите человечка с поднятой рукой: